常见问题解决方案
问题:无法吸收蛋白质。
解决方案:
a. 添加更多的配体(更浓缩的溶液)。
b. 去除一些表面活性剂,为表面留出配体吸附空间。
c. 用可以很好地粘附在颗粒上,并且可以与配体结合中间材料预涂微球。
d. 使用不同的缓冲液(不同的pH,离子强度等)。
问题:有很多配体结合,但是没有活性(方向不正确或堆积太紧密)。
解决方案:
a. 尝试或多或少的配体。 (吸附分子的方向通常受到空间因素的强烈影响。)
b. 使用“表面稀释剂”-另一种生化试剂,它将共吸附到表面上,以防止配体分子彼此之间过于紧密。
问题:清洗除去未结合的配体后,微球会结块。
解决方案:
a. 尝试在表面上放置更多的配体。
b. 添加阻断剂,例如BSA或非离子表面活性剂,以稳定悬浮液。
问题:配体吸附最初是最佳的,但是延长储存后,发生了脱附。
解决方案:
a. 将存储温度(如果在室温下存储)降低到2-8˚C。
b. 降低储存缓冲液中阻断剂的浓度。
c. 确认存储缓冲液中不包含可能与结合蛋白竞争并随时间推移引起解吸的杂质。