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双抗体夹心法检测原理是:首先将能够结合同一抗原的一对抗体分别固定于免疫层析检测试纸条的检测线(T线)与结合垫上,结合垫上的抗体带有显色标记(荧光标记、胶体金标记或彩色微球标记)。在试纸条滴样处滴加样品,样品会向试纸条另一端流动,当流动至结合...
2021-04-03
微球共价偶联一,引言当包被微球时,许多策略可以考虑,包括共价偶联,吸附和亲和力结合。每种方法都有其优点和缺点,应在研究目标,试剂要求,技术人员/实验室专业知识,时间表等背景下加以考虑。当需要非常活跃和稳定的微球试剂时,共价偶联通常用于固定生物分子。因为:•      生物分子是永久性结合的,不会随着时间的推移而解吸/浸出;•      消除微球之间的“串扰”,可以进行多重测试和测定;·   ...
2021-04-03
胶体稳定性注意事项乳胶微球以良好分散的形式在水性悬浮液中提供。它们在没有任何特定原因(例如抗体与抗原的相互作用)的情况下聚集,这是由于范德华力在颗粒之间起作用所致。 其效果是累加的,即由大量原子组成的胶体粒子,粒子彼此“吸引”的距离可以达到0.5 µm。1.    两个乳胶微球之间的排斥粒子中的静电排斥力足够强,以使粒子在类似于吸引物的距离上“感觉”到排斥力。推斥力是根据靠近表面的电荷所产生...
2021-06-23
表面特性即使颗粒表面带电,疏水性胶乳也会与任何疏水性分子牢固结合,包括蛋白质,核酸和许多小生物分子,例如药物和激素。疏水性乳胶产品通常在不含生物分子的系统中稳定。但是,在生物系统中,包括在免疫测定中的应用,微球很容易被各种蛋白质或多糖包被,大大降低了它们非特异性吸收生物分子的能力。蛋白质分子(如抗生物素蛋白,链霉亲和素和抗体)的特定不可逆吸附是通过简单地将乳胶和蛋白质混合在一起一段指定的时间...
2021-06-02
何为乳胶微球?胶体尺寸范围内的球形聚合物颗粒,乳胶微球是由无定形聚合物(通常是聚苯乙烯)形成的。对于直径<100 nm的颗粒,颗粒中聚合物链的平均分子量约为1x106g,对于较大的颗粒,下降至约2.4x105g。 聚苯乙烯链是直链烃链,其苯环与第二个碳原子相连。芳香环控制聚合物链缠绕并控制空间的方式。当查看粒子表面模型时,只能看到随机堆叠的苯环,偶尔会有链末端伸出。因此,该表面具有非常疏水的...
2021-05-26
常见问题解决方案问题:无法吸收蛋白质。解决方案:a. 添加更多的配体(更浓缩的溶液)。b. 去除一些表面活性剂,为表面留出配体吸附空间。c. 用可以很好地粘附在颗粒上,并且可以与配体结合中间材料预涂微球。d. 使用不同的缓冲液(不同的pH,离子强度等)。问题:有很多配体结合,但是没有活性(方向不正确或堆积太紧密)。解决方案:a. 尝试或多或少的配体。 (吸附分子的方向通常受到空间因素的强烈影...
2021-05-19
阻断剂微球包被后,通常将封闭剂(通过吸附)包被在微球上。使用溶解在存储缓冲液中的物质将阻止聚合物微球暴露疏水表面,将减少微球的非特异性结合和自聚集。这些化合物也用于使包被的微球与样品中的非目标分子之间的非特异性相互作用(例如蛋白质与聚合物表面之间的疏水相互作用)最小化。应当仔细选择封闭剂,以确保其有效地减少非特异性相互作用;某些阻断剂可能会干扰测试/测定,或实际上有助于非特异性结合。应该评估...
2021-04-18
缓冲液以下是吸附方案中常用缓冲液的一些基本配方。 通常,最大吸附发生在蛋白质的pI处或附近,因此应相应地选择缓冲液。 另外,许多研究人员报告说,以大约0.15 M的生理浓度向耦合缓冲液中添加NaCl可以提高吸附效率。 此信息仅作为一般指南。 可以根据您的应用需求随意替换缓冲液和/或调整浓度。1.    概述对于微球吸附方案中常用缓冲液的一些基本配方,通常,最大吸附发生在蛋白质的pI处或附近,...
2021-04-18
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